Тему бодро продолжаем, темпа не снижаем, после 40-ка рожаем:)

[Tsygnata]

Удачи

[Konfetova]

У нас ЕБ.

ну это вообще высший пилотаж!!!)) молодцы!) это очень обнадеживает!

[ya_mama_2018]

Девочки, всем привет!
Ходила сегодня на УЗИ, 6 недель.
СБ+ 120
КТР 4 мм.
Завтра пойду к врачу, сохраняемся.
Чувствую отвратительно себя, то голова кружится, то токсит, то живот тянет, старость не радость.
Надеюсь что все будет хорошо, в этот раз. Страшно , пипец.
Чихаю на Вас всех, заразным 44 летним! Апппчхиии!
И страничка моя, ловите
аааааааааапчхи

Ачешуеть... Поздравляю очень очень береги себя и малявку!
Спасибо за чихи (впервые обмазываюсь )
и возьму себе бузьку

[Мавика]

[Elena_t]

Зайч, девочки тут всё уже достаточно написали подробно, я соглашусь, бери официальное заключение ПГД своего эмбриончика и иди за альтернативным мнением к хорошему генетику.

Дай Бог тебе детку

[Elena_t]

Tsygnata, ох ну и новости Поздравляю тебя (тихонечко), как же порадовала. @@@@ на тебя, держитесь крепко друг за дружку с малышком, растите и развивайтесь благополучно Спасибо, что написала нам!

За чихи и спасибо, беру себе ️

ЕБ это такая удивительная вещь

[мечтающая мама]

Девочки, ну что, сегодня 3-й дц, вроде как начинаю 10-й и точно победный протокол️ Сегодня ре посмотрела, фоллики есть в стандартном для меня количестве, 4 и 3. И блин, снова в правом яичнике какой то фолликул переросток, как и в прошлые два прота, что за напасть Ре попросила сдать гормоны: фсг, лг, прог и эстрадиол и посмотрит послезавтра на результат и на УЗИ ещё раз. А пока эти два дня по 2 таблетки клостилбегита, это вообще что-то новое для меня, в первый раз так, но доктор говорит это подстегнёт все мои фоллики к росту, а потом уже продолжим обычную стиму, но опять скорее всего на утрожестане как и в прошлые разы из-за моего переростка. Вот такие новости на сегодня. Пожелайте мне удачи пожалуйста

Елена, привет! Удачи, держу кулаки. Пусть все будет, ангелов вам в помощь и аистов

[Elena_t]

Ура ура! Цыгната! Шепотом поздравляю!

Есть какой секрет в ЕБ? ))))
Ну всмысле мож какая новая технология и т.д.

Вот я давно читаю и не только этот сайт и прихожу к выводу, что есть категория у кого помле долгих лет неудач получается все самым натуральнвм способом.
Класс!
Это супер новость.
Девочки, лыжня есть!!!!!)))))

Мавика, а Цыгната после Белокурихи же вернулась как раз, если я не путаю.

Цыгната, подскажи, если там была, что делали из процедур?

[Elena_t]

Елена, привет! Удачи, держу кулаки. Пусть все будет, ангелов вам в помощь и аистов

Спасибо большое

[Зайчвадзе]

Я только что вышла от ре. Она поддерживает эмбриолога. Говорит надо переносить двоих. Хорошую девочку и мальчика 17хр. На понедельник записалась к генетику. Выслушаю. Потом приму решение.

[Зайчвадзе]

Цыгната, ого!!! Поздравляю, стотыщмильёнов кулаков!!!!

[Miracles]

Цыгната, я тоже в отпуск собираюсь
Давай мне свои ЦУ! Записываю!

Мож и правда какой секрет с мужем накрутили там?
Или просто опыт!

[Tsygnata]

Всем удачи

[Avrora Ri]

Девочки, всем привет!

аааааааааапчхи

Какие вы умнички!!!! Отдохнули хорошо и нас порадовали
Держись, дружочек(тихонечко держу за вас)оч хочется

С удовольствием ловлю чихи и беру

[Miracles]

Исследование хромосомной патологии в клетках неразвивающегося хориона методом высокопроизводительного секвенирования.

Резюме

Цель исследования: Определить частоту и структуру хромосомных нарушений методом высококопроизводительного секвенирования (NGS) в клетках неразвивающегося хориона.
Материалы и методы. 197 образцов хориона и 2 образца ткани мышцы плода, полученных от женщин в возрасте от 18 до 45 лет (средний возраст 34,3 года). Диагностика проводилась методом высокопроизводительного секвенирования (NGS).
Результаты. Хромосомная патология была обнаружена в 122 образцах из 199, что составило 61,3%. Анеуплоидия по одной хромосоме была представлена в 100 наблюдениях; патология с вовлечением двух хромосом - в 7; триплоидный набор в 9. По данным исследования трисомия хромосом занимает лидирующее место- 76%. Моносомии в основном были представлены недостачей одной из половых хромосом. Чаще патологические изменения наблюдали по хромосомам 16, 22 и одной из половых хромосом.
Заключение. На основании полученных результатов можно сделать заключение, что метод NGS зарекомендовал себя как высокоэффективный современный метод для диагностики анеуплоидий и может быть предложен не только для исследования клеток неразвивающегося хориона, но и в качестве профилактического метода при проведении пренатальной диагностики.
Ключевые слова: NGS, высокопроизводительное секвенирование, невынашивание беременности, неразвивающаяся беременность.

ВВЕДЕНИЕ

Частота невынашивания от всех желанных беременностей в популяции на протяжении многих лет составляет 15-25% [1, 2, 3]. Изучение кариотипа у неразвивающихся плодов проводят с целью выяснения причин невынашивания беременности. В настоящее время знания о хромосомном наборе спонтанных абортусов могут быть полезными при выборе последующей тактики лечения этих пациентов.

Основной процент (75-80%) прерываний беременности приходится на I триместр. В основе невынашивания беременности у этого контингента лиц могут лежать как генетические отклонения в эмбрионе, так и многоплодие, хронические инфекции, анатомические особенности матки, гормональные нарушения и т.д.

По данным литературы, в популяции до 50-60% ранних выкидышей связаны с хромосомными аномалиями. Многие авторы утверждают, что спонтанные аборты до 12 недель беременности являются хорошим индикатором генетических нарушений в эмбрионе [4, 5, 6, 7,8]. Несмотря на то, что к настоящему времени проведена серия масштабных цитогенетических исследований клеток спонтанных абортусов, существует ряд данных, противоречащих друг другу, касающихся частоты и спектра хромосомных нарушений у эмбрионов при неразвивающихся беременностях.

Молекулярные методы исследования хромосомной патологии в различных тканях находят все большее применение в диагностике [5]. Это связано с тем, что для данного метода нет необходимости культивировать клетки. Классическим цитогенетическим методом не всегда удается получить результат исследования. Зачастую это связано с низкой пролиферацией или ее отсутствием в исследуемых клетках.

Цель исследования

Определить частоту и структуру хромосомных нарушений методом высококопроизводительного секвенирования (NGS) в клетках хориона неразвивающихся беременностей.
Материал и методы

Контрольным материалом служили клетки хориона с известной патологией (была проведена предварительная пренатальная диагностика), полученные хирургическим путем в ходе прерывания беременности по желанию пациентки. Во всех случаях результаты цитогенетического исследования совпали с результатами секвенирования. Образцы, полученные от неразвивающихся беременностей, доставляли в лабораторию в изотоническом физиологическом растворе при температуре +4С. Материалом для исследования служила ДНК, выделенная из клеток хориона или мышцы плода. Всего было исследовано 197 образцов хориона и 2 образца ткани мышцы плода, полученных от женщин в возрасте от 18 до 45 лет (средний возраст 34,3 года). 5 образцов были проанализированы дополнительно из высушенного хориона на специализированных картах для сбора биологических образцов производства компании АлкорБио, г. Санкт-Петербург (фото карты представлено на рис. 1, результаты представлены на рис.2) . Средний срок прерывания беременности составил 8,5±2,1 недель (от 5 до 16 недель).

ДНК из клеток получали стандартным методом для выделения ДНК наборами компании Promega (USA). Секвенирование проводили согласно технологии Illumina на приборе Miseq. Данные, полученные прибором обрабатывали с помощью программного обеспечения BlueFluse Multi.

Полученные данные

Хромосомная патология была обнаружена в 122 образцах из 199, что составило 61,3%. Частота патологии у женщин разного возраста представлена в таблице 1.

Таблица 1.
Частота хромосомной патологии в клетках хориона у женщин в различных возрастных группах

Возрастная группа женщин % выявленной патологии
До 35 лет 55,6%
35-40 лет 60,0%
Старше 40 лет 72,0%
Анеуплоидия по одной хромосоме была представлена в 100 наблюдениях. Патология с вовлечением двух хромосом была отмечена в 7 наблюдениях, триплоидный набор в 9 случаях. Сочетание анеуплоидии с мозаицизмом были выявлены в 6 наблюдениях табл. 2.

Таблица 2.
Количество патологических изменений (все возрастные группы)

Кол-во хромосом, вовлеченных в патологию Частота встречаемости (%)
1 хромосома 82
2 хромосомы 5,7
Сочетание анеуплоидии с мозаицизмом 4,9
Триплоидный хромосомный набор 7,4
По частоте встречаемости, трисомия хромосом занимает лидирующее место- 76%. Моносомии в основном были представлены недостачей одной из половых хромосом (15 наблюдений). Только в одном наблюдении моносомия была представлена хромосомой 21.

Дупликации/делеции (рис. 4) и мозаицизм были выявлены в одинаковом проценте случаев - 4%. Наиболее часто патологические изменения наблюдались по хромосомам 16, 22 и одной из половых хромосом (20%, 12,9% и 17,1%, соответственно).

ОБСУЖДЕНИЕ

Результаты нашего исследования показали, что у женщин старше 40 лет, более чем в 70 % наблюдений выявлены хромосомные нарушения. Высокий процент генетической патологии у этой категории пациентов был отмечен и другими авторами [4,5]. Анализ сравнения кариотипа у абортусов женщин различных возрастных групп позволил обнаружить увеличение частоты хромосомной патологии от возраста женщин. Золотухина Т.В. с соавт. (2003, [9]) также отметили зависимость повышения уровня хромосомных изменений в абортусах от возраста женщин. Результаты анализа показали, что у пациенток в возрасте от 20 до 30 лет преобладали абортусы с нормальным кариотипом; в возрасте от 31 до 40 лет - превалировали плоды с хромосомными аберрациями; в возрасте старше 40 лет - все плоды имели аномальный кариотип.

Другие авторы сделали заключение, что у пациенток старше 40 лет в 82% случаях потеря беременности может быть связана с изменениями в кариотипе у эмбриона [3].

Низкий уровень выявленной моносомии указывает на то, что эмбрионы с такой патологией имеют низкий потенциал развития. В структуре моносомий, отсутствие одной из половых хромосом занимает почти 100%

Анеуплоидии в клетках хориона одновременно по 2 хромосомам, делеции/дупликации встретились достаточно редко, что тоже указывает на то, что данная патология может оказывать негативное влияние на потенциал развития эмбриона.

Полученные данные указывают на то, что необходимо обращать внимание на возраст пациенток при планировании беременности, как при естественном зачатии, так и при проведении программы ВРТ. Женщинам с бесплодием за 35 лет необходимо предлагать проведение программы ЭКО с преимплантационным скринингом эмбрионов на анеуплоидии. Перенос одного здорового эмбриона, не только позволит родить ребенка без патологии, но и предупредить прерывание беременности больным плодом, что может негативно сказаться на физическом и психическом здоровье женщины.

Полученные нами идентичные профили при исследовании свежего и высушенного на карте материала, полученные однозначные результаты, указали на то, что клетки высушенного хориона на карте для хранения биологического материала не оказывают влияние на результат анализа и карты могут быть использованы для хранения материала, в тех случаях, когда невозможна его транспортировка в ближайшее время.

Исследование клеток неразвивающегося хориона может внести большой вклад в понимание процесса мейоза и, что не маловажно, будет способствовать разработке новых профилактических мероприятий, предотвращающих невынашивание беременности как при естественном зачатии, так и в рамках программы ВРТ.

На основании полученных результатов можно сделать заключение, что метод NGS зарекомендовал себя как высокоэффективный современный метод для диагностики анеуплоидий и может быть предложен не только для исследования клеток неразвивающегося хориона, но и в качестве профилактического метода при проведении пренатальной диагностики.

[Miracles]

решили сами пробовать и вот оно. Тошнить еще до задержки стало, и грудь налилась. Сделала тест на 26 дц, а там жирные 2 полоски

Аааааа, я тоже так хочу!!!

Ну давай, давай, зарази уже нас скорее беременностью!

[Мавика]

Я тоже ловлю чихи, и двух аистов. С телефона не могу прикрепить.
1+1

[Мавика]

[sharka]

Девочки, всем привет!
Ходила сегодня на УЗИ, 6 недель.
СБ+ 120
КТР 4 мм.
Завтра пойду к врачу, сохраняемся.
Чувствую отвратительно себя, то голова кружится, то токсит, то живот тянет, старость не радость.
Надеюсь что все будет хорошо, в этот раз. Страшно , пипец.
Чихаю на Вас всех, заразным 44 летним! Апппчхиии!
И страничка моя, ловите
аааааааааапчхи

Ааааааа!!!!! Ура-ура-ура!!!!! Как я рада, как я рада!!! Пусть Боженька бережет твою детку ещё 34 недельки!!! Лёгкой беременности и родов в срок!!! ЕБ- чудо расчудесное!!!
Обмазываюсь твоими чихами трижды с головы до ног и аистов беру и по твоей проторенной лыжне иду навстречу своему чуду! Завтра на УЗИ, 9 ДЦ, посмотрим как эндик растет.

[sharka]

Я только что вышла от ре. Она поддерживает эмбриолога. Говорит надо переносить двоих. Хорошую девочку и мальчика 17хр. На понедельник записалась к генетику. Выслушаю. Потом приму решение.

Правильного тебе решения!!!@@@@@@ и дай Бог поскорее забеременеть и через 40 недель стать мамой!!!

Я тоже иногда думаю что смирюсь что детей не будет, что тоже много денег потрачено, что уже возраст, что сил нету, а потом как приеду к маме домой, как потискаю крестниц своих и сразу думаю- ну ни хера, ни за что! Как говорится "усяр..уся но не покорюся"! Мы точно станем мамами!

[sharka]

Девочки, ну что, сегодня 3-й дц, вроде как начинаю 10-й и точно победный протокол️ Пожелайте мне удачи пожалуйста

Я от всей души желаю тебе чтоб 10-й точно стал крайним и победным!!! И можно вдвойне!!! @@@@@@@@

[Elena_t]

Я от всей души желаю тебе чтоб 10-й точно стал крайним и победным!!! И можно вдвойне!!! @@@@@@@@

Спасибо, Шарочка ты тоже в протоколе? Пусть всё будет забеременительно@@@@@@@@

[Avrora Ri]

Ой девочки, давайте, с богом!!!! Чтоб осень у нас плодовитая была

[Tsygnata]

Про донора и ПГД. Подруга в победном протоколе была с донором , 33 года. Взяли 18 клеток, получилось 9 эмбрионов. 5 заморозили, 4 сделали ПГД, только 2 к переносу. Переносили по 1, 2 раза, оба пролет. Перенесла в июне 2 без ПГД, один замер на 8 неделях, второй с мамой встретит 46 лет, прошли скрининг все ОК.

[Miracles]

Блин, вот и думай теперь...

[Miracles]

Девочки:
Анна Понка, Парижанка, Рушка, Тати - как у вас дела? Куститесь?

[sharka]

Девочки, я с УЗИ, 9дц, эндометрий- маленький, всего 4,2. Продолжаем мазать эстрожель и добавили вагинально эстрофем. В пятницу опять посмотрим. Если тенденции к хорошему росту не будет- перенесем крио на следующий цикл. Мой Ре переживает за меня и говорит- лучше отложим, но подготовимся идеально. Он знает что это последний шанс, так сказать и криошками рисковать не хочет.

[Rooshka]

Девочки, всем привет!
Ходила сегодня на УЗИ, 6 недель.
СБ+ 120
КТР 4 мм.
Завтра пойду к врачу, сохраняемся.
Чувствую отвратительно себя, то голова кружится, то токсит, то живот тянет, старость не радость.
Надеюсь что все будет хорошо, в этот раз. Страшно , пипец.
Чихаю на Вас всех, заразным 44 летним! Апппчхиии!
И страничка моя, ловите
аааааааааапчхи

ОООО! как круто!!!
ураураура!!!!
пусть крепко держится и растет как нужно!!!

Хватаю срочно аистов!

[Rooshka]

Ну то есть и запускаю тоже))

[tiramisu]

Miracles, Вы там где то статистику участниц завели, добавили бы и меня туда.
Tsygnata, вы красавица и молодец. Пойду почитаю вашу историю.
Дайте два

[Rooshka]

Девочки:
Анна Понка, Парижанка, Рушка, Тати - как у вас дела? Куститесь?

я жду начала цикла чтобы начать протокол - все назначения в лапках, жду первого дня, чтобы сдать кровь и начать)
Меня в короткий протокол на этот раз, не знаю чем ей результат длинного ненр, но в общем короткий на пурегоне350 - посмотрим, как пойдет.
У меня была минутная слабость, когда я подумала, может сделать перерыв подольше, отдохнуть скататься...вообще как-то расслабиться после протоколов и лапар этих всех бесконечных...Но блин каждый месяц же на счету для моих несчастных ЯК, так что пойду сейчас - а отдыхать буду беременная уже потом))) вот)

[Miracles]

sharka
Конечно лучше перенести на цикл, где будет уверенность!
Очень жаль, что эндик не растет!
Почему?

[Miracles]

Rooshka, канеш, отдохнешь беременная ! :loudlaff:
Давай,давай, не отлынивай.
@@@@@

[Miracles]

Miracles, Вы там где то статистику участниц завели, добавили бы и меня туда.

Конечно добавлю!
Что именно ?

[Miracles]

Взяла,спасибо